文章作者-奧克泰士趙工
一.什么是發(fā)酵罐
發(fā)酵罐是指用來進(jìn)行微生物培養(yǎng)和發(fā)酵的裝置,其主體一般是采用不銹鋼材料制成的圓筒結(jié)構(gòu),其容積在一立方米至數(shù)百立方米。發(fā)酵罐廣泛應(yīng)用于制藥、乳制品、飲料、保健食品、生物工程、精細(xì)化工等行業(yè),被用來培養(yǎng)微生物,令微生物高效生長和分泌目標(biāo)產(chǎn)物等,是一個非常重要和關(guān)鍵的工業(yè)設(shè)備。
二.微生物的排他性
自然環(huán)境中微生物種類眾多,且基本上都具有某種性質(zhì)的生物排他性,即在某種菌大量繁殖的地方,其他微生物的數(shù)量和種類都會受到一定程度的抑制。發(fā)酵罐是用來培養(yǎng)類型的微生物(目標(biāo)微生物),為了目標(biāo)微生物的生長不受其他微生物影響,所以發(fā)酵罐在接種前需要進(jìn)行滅菌。
三.發(fā)酵罐蒸汽滅菌
蒸汽滅菌是一種常見的發(fā)酵罐滅菌方法,它利用高溫高壓的蒸汽對發(fā)酵罐內(nèi)壁和內(nèi)部物料進(jìn)行滅菌處理,這個過程可以有效殺滅各種細(xì)菌、真菌、病毒等微生物。
(1)蒸汽滅菌優(yōu)點:
滅菌效果好、速度快、操作簡單。理論上,它可以有效殺滅各種細(xì)菌、病毒和真菌,包括難以滅活的芽孢菌。同時,由于蒸汽可以充分地滲透或熱傳導(dǎo)到物品內(nèi)部,因此可以對各種形狀和大小的物品進(jìn)行滅菌處理,包括液體、固體和氣體等。
(2)蒸汽滅菌缺點:
蒸汽滅菌要求發(fā)酵罐材質(zhì)和內(nèi)部物料能耐受蒸汽,有一定操作彈性、內(nèi)部附件盡量減少(避免死角)、物料與能量傳遞性能強(qiáng),并可進(jìn)行一定調(diào)節(jié)以便于清洗、減少污染,所以一旦上述方面出現(xiàn)問題就會在一定程度上影響最終的滅菌效果。另外,即使是發(fā)酵罐是采用蒸汽高溫殺菌,但在實際生產(chǎn)中也偶爾出現(xiàn)滅菌失敗的情況——尤其是常出現(xiàn)耐熱芽孢導(dǎo)致的滅菌失敗。
四.發(fā)酵罐蒸汽滅菌失敗的常見原因
不合理的裝載、滅菌物的預(yù)處理不當(dāng)、未充分排除冷空氣等因素會影響蒸汽滅菌的完成程度,會在一定程度上削弱蒸汽飽和程度、蒸汽的穿透能力、蒸汽的熱傳導(dǎo)效力等參數(shù),使其達(dá)不到理想的效力,尤其當(dāng)這些因素與極度耐熱微生物同時出現(xiàn)時,就會在極大幾率上會出現(xiàn)滅菌失敗的情況。
芽孢桿菌,尤其是超級耐熱芽孢對溫度有著較高的抗性。芽孢在形成時會合成一些特殊的酶,這些酶比繁殖體中的酶具有更強(qiáng)的耐熱性。芽孢核心和皮質(zhì)層中含有大量吡啶二羧酸(簡稱DPA),占芽孢干重的5%-15%,是芽孢的成分,在細(xì)菌繁殖體和其他生物細(xì)胞中都沒有。DPA能以一種目前尚不明確的方式,使芽孢的酶類具有高的穩(wěn)定性。芽孢形成過程中會很快合成DPA,同時也獲得耐熱性。
所以,即使在理想情況下,蒸汽對芽孢的殺滅也有一定局限,更何況實際蒸汽滅菌操很難達(dá)到理想的理論程度,所以在現(xiàn)實中發(fā)酵罐經(jīng)蒸汽滅菌后仍然會出現(xiàn)微生物污染的情況,其中最頻繁的情況是耐熱芽孢污染。
五.解決發(fā)酵罐的芽孢污染的方法
殺滅芽孢有效的方式之一采用殺孢子劑(Sporicide)處理。殺孢子劑是個舶來詞,是英文Sporicide的翻譯,意思是能夠殺滅“spore"的藥劑,由于spore同時代表芽孢和孢子,孢子也是一種常見的高抗性微生物種類,所以Sporicide被譯為殺孢子劑,但其合理的解釋應(yīng)該是殺芽孢劑。
從名稱上就可以看出,殺孢子劑能夠有效殺滅芽孢。所以在發(fā)酵罐進(jìn)行蒸汽滅菌前,可以使用殺孢子劑對發(fā)酵罐進(jìn)行預(yù)處理消毒,消除可能存在的芽孢污染,這將有效保障蒸汽滅菌的成功率。另外,使用殺孢子劑可有效解決無法耐受高溫蒸汽的環(huán)節(jié)中的芽孢污染。
奧克泰士Oxytech來自德國,作為一款殺孢子劑和滅菌劑,能夠有效殺滅包括耐熱芽孢在內(nèi)的所有類型微生物。奧克泰士Oxytech采用特殊的復(fù)合工藝制造,具備多重機(jī)理殺菌作用,所以其優(yōu)勢之一就是可以在較低的藥劑濃度下實現(xiàn)對芽孢的殺滅,這樣就同時具備了良好的材料相容性,將腐蝕性控制在了極低的水平之內(nèi)。其作用完畢后分解為水和氧氣,生態(tài)安全,不會對后續(xù)的發(fā)酵工作產(chǎn)生影響,保護(hù)操作人員的職業(yè)健康。
六.多種方式綜合保障滅菌效果
對于發(fā)酵罐滅菌,一方面要優(yōu)化設(shè)計和科學(xué)合理操作,盡量減少死角,保障蒸汽能力傳導(dǎo)覆蓋全部的表面和物料,使實際操作效果接近理論滅菌。另外,要選擇合適的方式來解決耐熱芽孢等高抗性污染,彌補(bǔ)蒸汽滅菌在現(xiàn)實操作中可能存在的不足和盲區(qū),最終實現(xiàn)對發(fā)酵罐的成功滅菌。
撰稿人:奧克泰士技術(shù)工程師-趙工
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